ABSTRAK Es batu kerap dikonsumsi oleh masyarakat Indonesia. Sebagian berpendapat bahwa es batu yang dijual oleh pedagang kaki lima adalah es batu yang berasal dari air mentah akan tetapi pedagang kaki lima banyak yang kurang mengutamakan faktor sanitasi dan hygiene yang mana akan menimbulkan penyakit yang disebabkan oleh bakteri. Tujuan dari penelitian adalah untuk mengetahui apakah bakteri Escherichia coli terdapat di es batu yang dijual pada pedagang kaki lima di daerah bekasi, tepatnya di RW 13 Kecamatan Babelan Bekasi Utara, mengingat di daerah tersebut banyak pedagang kaki lima yang menjual es batu namun tidak memperhatikan faktor kebersihannya. Metode pengujian pada penelitian ini adalah Most Probable Number Coliform yang terdiri dari 3 pengujian yaitu uji penduga, uji penguat, uji pelengkap. metode penelitian MPN Coliform dipilih karena cukup efektif untuk mengetahui keberadaan bakteri Escherichia coli pada tahap uji pelengkap. Hasil yang diharapkan dari sampel es batu yang dijual oleh pedagang kaki lima di RW 13 Kecamatan Babelan Bekasi Utara dapat memenuhi kualitas mikrobiologi tanpa adanya cemaran bakteri Escherichia coli